培养基的配制

  1、将用于配制培养基的容器洗净，加入培养基总量四分之三的蒸馏水，放入所需的琼脂和糖，然后加热溶解。在加热过程中应不断地搅拌，以避免琼脂粘锅或溢出。

  2、待琼脂和糖完全溶解后，按顺序加入各贮备液以及所需的植物激素。

  3、用蒸馏水定容补充由于加热蒸发所损失的体积。

  4、用蒸馏水调整pH。

  5、通过漏斗或下口杯将培养基注入组组织培养容器内，注入量为瓶容积的十分之一左右。灌装要迅速，尽可能避免培养基粘在瓶壁上，且应在培养基未冷却之前灌装完毕。

  6、用封口膜或含透气膜的塑料盖将瓶口或试管口封严。

  7、将封装好的组织培养容器码放在高压灭菌锅内。于105Pa压力、121℃下灭菌20分钟。如使用小型手提式灭菌锅时，一定要注意，当锅内压力上升时，先反复放气数次，将锅内空气排尽以后，再计算时间，否则达不到高压灭菌的效果。

  8、对于一些受热易于分解的物质，如维生素类，可采取先过滤灭菌的方法。待培养基灭菌后，尚未冷却之前(40℃左右)加入并摇匀。经过高压灭菌的培养基可在室温下存放3-5天，或在冷藏箱内存放10天左右，建议在短时间内用完。